本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中兔子纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)水平.用純化的兔子纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入PAI-1,再與HRP標記的羊抗兔抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過徹底洗滌后加底物TMB顯色.TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色.顏色的深淺和樣品中的PAI-1呈正相關.用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中兔子纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-343)濃度.$n
目的:研究兔實驗性肺血栓栓塞 (PTE)后組織型纖溶酶原激活物抑制因子-1(PAI-1)在肺動脈中表達的動態變化.方法:日本健康大耳白兔48只隨機平均分為栓塞組和對照組,栓塞 組利用自體血栓經股靜脈輸入建立PTE模型,對照組輸入生理鹽水.用免疫組織化學及Western blot方法檢測對照組及栓塞后即刻,4,8和24 h栓塞部位肺動脈組織中PAI-1蛋白表達的水平.結果:PAI-1在栓塞后即刻及24 h均見明顯表達,而在栓塞后4 h和8 h表達明顯減少;Western blot檢測PAI-1蛋白在栓塞后4 h開始降低,8 h降低至低峰,與各對照組比較,差異有統計學意義(P0.05).結論:兔急性肺栓塞后,機體抑制纖溶能力表現為一過性降低,說明在肺動脈栓塞后,特別是 嚴重的大面積栓塞后,單純依靠肺動脈局部的纖溶抑制系統平衡變化不能達到溶解全部栓子的目的,其原因可能與PAI-343表達呈一過性下降有關.
關鍵詞:
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